为了做实验，细胞铺匀是常见的一种。然而，有许多人不是很成功，分布也不均匀:要么中间密集，周围稀疏，要么周围密集，中间秃顶。以下是利用96孔板把细胞铺匀，希望对大家有用!
方法/步骤
1、通常，在96孔板的每个孔中加入100微升的细胞悬浮液。 从底部附近的井的左侧添加细胞悬浮液。 加入一半平板后，混合细胞悬液，不要再加入，继续加入剩余的一半平板。 添加完所有板后，盖上板，用左手轻轻握住板的左侧，用右手轻轻轻敲板的右边缘，注意抓力(我通常轻敲三次)。 如果它太强或太弱，细胞就会被浓缩和堆积。 顺时针旋转盘子(逆时针效果不好)，依次敲击剩余的三面，静置约5分钟，放入37度培养箱中。
对于6孔板、12孔板或24孔板，我在第一个孔中加入少量无血清培养基，摇动并渗透到整个孔的底部，然后用移液管枪将整个孔的底部吸到第二个孔中。用同样的方法渗透到井底，同时模拟其它井，这样整个井底都是湿的，细胞悬浮液将平放在整个井底。 加入细胞悬液时，可以避免中间加入更多细胞，中间加入更少细胞的现象，细胞分散更均匀。 注意，加入细胞悬液后，细胞悬液应放在工作台上静置。这个方法有点慢，但是当你熟练的时候它并不慢。也可以涂抹，但强度不如96孔板，效果不如96孔板，所以我放弃了渗透井底的方法。
个人经验，仅供参考。用6孔板养细胞最初放下去的细胞浓度最好是每空7-10万，不能太少了。一般每空加2ML培养液。成纤维细胞接种8万每孔的话一般3-4天可以长满。
2、加入细胞悬液后，抬起细胞培养板，从底部向上观察光线，看细胞是否聚集。然后从底部敲击以分散它。
3、如果实验室有平板振荡器，建议用这个仪器轻微振荡。 效果好，即振幅小、频率高。
4、细胞应该尽可能分散，大多数细胞处于单一状态。离心后，完全悬浮!有转移到六孔板上的，就是震动!摇晃时，不要让细胞液转向，否则细胞会全部被带到中间而不均匀!
六孔板铺板加多少ul，这个问题取决于您要使用的六孔板的类型和尺寸。如果您使用的是标准的六孔板，那么您需要加入200ul的液体。如果您使用的是大型六孔板，则需要加入更多的液体，最多可以加入500ul的液体。此外，您还需要考。
7、先上下移动，然后在水平板上左右移动，每个方向移动5-6次，但关键是摇动后直接放入培养箱，不要做太多的运动，如照镜子，否则很容易在中间再次聚在一起。
6孔板底面积9.6cm2，加培养液的量2.5ml。12孔板底面积4.5cm2，加培养液的量2ml。24孔板底面积2cm2，加培养液的量1ml。96孔板底面积0.32cm2，加培养液的量0.1ml。无毒和无菌是体外培养细胞的首要条件。细胞在活体。
